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使用高效液相色譜柱做HPLC分析時,通常會遇到色譜柱柱壓過高等情況,色譜柱柱壓過高原因何在?怎么解決呢?高效液相色譜柱柱壓高原因與解決方法:色譜柱柱壓過高是HPLC柱用戶最常碰到的問題。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的問題,您可按下面步驟檢查問題的起因:1、拆去保護柱,看柱壓是否還高,否則是保護柱的問題,若柱壓仍高,再檢查2、把色譜柱從儀器上取下,看壓力是否下降,否則是管路堵塞,需清洗,若壓力下降,再檢查3、將柱子的進出口反過來接在儀器上,用10倍柱體積的流動相沖洗柱...
7-5
液相色譜柱流動相的配制和流速的選擇1、流動相的配制液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的,因此要求流動相具備以下的特點:(1)流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。(2)流動相與樣品不產生化學反應(3)流動相的黏度要盡量小,以便得到好的分離效果;降低柱壓降,延長泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。(4)流動相的物化性質要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器,最好使用對紫外吸收較低的溶劑配制...
6-28
氣相色譜柱在石油、化工、生物化學、醫(yī)藥衛(wèi)生、食品工業(yè)、環(huán)保等方面應用很廣。它除用于定量和定性分析外,還能測定樣品在固定相上的分配系數、活度系數、分子量和比表面積等物理化學常數。氣相色譜柱柱溫的選擇:柱溫是影響分析時間和分離度的重要因素。選擇柱溫的依據是樣品的沸點范圍,固定液的配比,允許使用溫度,以及檢測器的靈敏度。柱溫主要影響分配系數、容量因子以及組分在流動相和固定相中的擴散系數,從而影響分離度和分析時間。選擇溫柱的原則,一般是在使難分離物質對達到要求的分離度條件下,盡可能采...
6-23
液相色譜柱是液相色譜分離能力的核心部分,其規(guī)格有哪些呢?按用途可分為分析型和制備型兩類①常規(guī)分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱長10~30cm;⑥生產制備柱內徑可達幾十厘米。液相色譜柱的一些注意事項:1、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動溫度的突然變化...
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UHPLC色譜柱特點:●高純球形硅膠填料?!窳接?.8μm和2.2μm鍵合各種官能團?!駲C械穩(wěn)定性優(yōu)異,可耐受壓力至10000psi?!裰行?、酸性、堿性化合物峰形美,柱效高?!裰噩F性好。UHPLC色譜柱的維護措施:1、使用保護柱2、大多數柱的PH穩(wěn)定范圍是2-7.5,盡可能在此范圍內使用3、避免流動相組成及極性有劇烈變化4、流動相使用前必須經脫氣和過濾處理5、如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,要在實驗完畢將柱子沖洗干凈6、壓力升高時更換保護柱
6-15
免疫親和柱的全稱為免疫親和層析柱(immnuoaffinitychromatographycolumns,IAC),常簡稱為:親和柱、免疫親和柱、親和層析柱等。它是利用抗原抗體特異性可逆結合特性的SPE技術,根據抗原抗體的高選擇性,從復雜的待測樣品中提取目標化合物。主要原理是將抗體與惰性微珠共價結合,然后裝柱,將抗原溶液過免疫親和柱,而非目標化合物則沿柱流下,最后用洗脫緩沖液洗脫抗原,從而得到純化的抗原。使用免疫親和柱凈化的優(yōu)勢:因為免疫親和柱的高特異性,使用免疫親和柱凈化可...
6-8
離子色譜柱位于進樣器與分析柱之間,是液相色譜分析中重要的色譜耗材,使用保護柱可大大降低分析柱受污染的程度,延長分析柱使用壽命。離子色譜柱的一些常見的問題分析:1.柱壓升高在檢查流路沒有阻塞的前提下,更換離子色譜柱過濾網板,一般情況下更換保護柱進口端的網板。2.分離度降低可以是由于離子色譜柱的柱效降低或選擇改變所引起的,可以通過適合的清洗對離子色譜柱進行清洗,或者改變離子色譜的流動相來改善分離。3.死體積增大由于分離柱入口樹脂壓力使樹脂造成空隙或才樹脂壓碎而成,使離子色譜分離度...
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